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重組結(jié)核分枝桿菌Mr 38 000蛋白的表達(dá)、純化和鑒定
摘要 從H37Rv基因組中擴增Mr38 000 蛋白基因并高效表達(dá)和純化。用PCR技術(shù)從結(jié)核分枝桿菌H37Rv基因組中擴增Mr 38 000蛋白序列,將其與pGEM-T-Easy 載體連接轉(zhuǎn)化E.coli DH5α,構(gòu)建重組克隆載體pGEM-T-Easy/ Mr 38 000,測序正確后將目的基因片斷克隆入pQE-80L原核表達(dá)載體并轉(zhuǎn)化E.coli DH5α,IPTG誘導(dǎo)目的蛋白表達(dá)。 經(jīng)Western-blot 鑒定目的基因與(His)6融合表達(dá),將已表達(dá)的蛋白質(zhì)通過N