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重組結(jié)核分枝桿菌Mr 38 000蛋白的表達、純化和鑒定

 摘要 從H37Rv基因組中擴增Mr38 000 蛋白基因并高效表達和純化。用PCR技術(shù)從結(jié)核分枝桿菌H37Rv基因組中擴增Mr 38 000蛋白序列，將其與pGEM-T-Easy 載體連接轉(zhuǎn)化E.coli DH5α，構(gòu)建重組克隆載體pGEM-T-Easy/ Mr 38 000，測序正確后將目的基因片斷克隆入pQE-80L原核表達載體并轉(zhuǎn)化E.coli DH5α，IPTG誘導目的蛋白表達。 經(jīng)Western-blot 鑒定目的基因與(His)6融合表達，將已表達的蛋白質(zhì)通過N